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宽场显微镜荧光成像光学切片 > Apotome3
 
 
荧光光切产品 Apotome 3

宽场显微镜荧光成像的光学切片

为您的荧光样品创建光学切片——无杂散光。利用结构照明,可以简单有效地消除非焦平面杂散光,便于完全专注于科学研究。蔡司Apotome 3能够识别放大倍率并将适当的栅格移至光路中。随后,系统会从不同栅格位置的多幅图像中计算出光学切片图像。它是一种非常有效的消除非焦平面杂散光的方法,同样适用于比较厚的样品。系统操作非常简便。优质的光学切片——让您获得出色分辨率和高对比度图像。

  • 优质的光学切片:蔡司Apotome 3具有三种不同几何性状的栅格,无论您选择何种放大倍率,都可以保证高分辨率。

  • 自由选择光源和染料:蔡司Apotome 3可适应荧光团和光源。因此,当实验的复杂性和需求发生变化时,您也可以灵活应对。
  • 更多结构化信息:凭借结构照明算法,您甚至可通过反卷积进一步改善图像质量。更好地识别所检查对象的重要结构。
 
详细介绍
 

优质的光学切片

要对尺寸从几百微米到几纳米范围内的结构进行成像,通常需要不同放大倍数的物镜。Apotome 3具有三种不同几何形状的栅格,可保证每一颗物镜成像的高分辨率。您只需要关注实验本身,因为系统可自动选择合适的栅格,时刻确保获得高对比度的光学切片。与传统宽场荧光显微图像相比,Apotome 3能够显著提高轴向分辨率:您可以获得支持三维渲染的优质光学切片,厚的样品也不例外。

自由选择光源和染料

实验的复杂性和需求往往随着时间发生变化。因此您的设备不仅需要注重性能,还应具有灵活性。将Apotome 3与传统的金属卤化物灯、经济型LED白光光源或柔光、多色Colibri照明系统结合使用。使用时仅需更换滤色片,系统便会自动将栅格移至正确位置。任何染料都不受技术上的制约:不论是DAPI、Alexa488、Rhodamin、Cy5还是活体染料,如GFP或mCherry——Apotome 3都能够适应荧光和光源,生成您期望的优质清晰图像。

更多结构化信息

凭借结构照明的特有算法,您甚至可以借助蔡司Apotome 3通过反卷积进一步改善图像质量。在保留所有原始数据的同时,该系统还允许在宽场、光学切片以及反卷积的图像之间切换,实现出色的灵活性和兼容性。反卷积算法快速、稳健且易于使用,能够改善图像的横向和轴向分辨率。因对比度改善、光学分辨率更高且现有噪声得到抑制,您可以更好地识别样品更细微的结构。

工作原理

优化光学切片厚度的三种栅格

您的相机能够检测到焦平面以外的光。根据试样的厚度和体积降低对比度和分辨率(图A:通过传统反射荧光照明法获取图像)。

蔡司Apotome 3可自动将匹配的栅格放入显微镜光路中,不受放大倍数的影响。减少不需要的背景荧光能够增加栅格的频率,使光学切片变得更薄。来自焦平面以外的图像信息则受到抑制(图B、C和D),因此改善了光学切片的对比度和分辨率。示例(图D)中,“低栅格”可优化切片厚度。此类图像尤其适用于3D分析以及通过渲染软件处理图像数据。

蔡司光学切片 Apotome 3 - 优化光学切片厚度
秀丽隐杆线虫,全样载片,绿色:GFP,蓝色;DAPI,物镜:Plan-Apochromat 20 ×/0.8 视频由德国布伦瑞克工业大学的Schnabel教授提供。

扫描机理

蔡司Apotome 3将栅格结构投射到样品的焦平面,随后使用扫描机构将其移至不同位置。Apotome 3在每一栅格位置都能够自动获取一张数字图像。系统使用特有算法将所有的图像处理成一个具有高对比度和分辨率的光学切片。产生的图像无栅格结构。

荧光激发光会穿过Apotome 3载玻片中的两块玻璃板。当栅格结构应用于第一块玻璃板时,栅格图案会被投影激发光中。扫描组件机构会倾斜第二块玻璃板,栅格图像便在样品的焦平面内平移。

蔡司光学切片 Apotome 3 - 栅格投影


 
 

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